Inhibition of acetylcholinesterase from musca domestica and apis mellifera by organophosphates

Abstract

집파리 (Musca domestica)와 꿀벌 (Apis mellifera)로부터 추출한 AChE를 친화 크로마토그래피로 순수 정제하였다. 집파리와 꿀벌로부터 추출 정제된 효소는 capillary electrophoresis를 통해서 순수 정제 된 것으로 확인되었다. 집파리 AChE의 경우에는 정제율이 957배, 비활성이 290 μ㏖/min/㎎, 수율이 42% 로 측정되었고 꿀벌 AChE의 경우에는 정제율이 234배, 비활성이 32.59 μ㏖/min/㎎, 수율이 37%로 측정 되었다. 기질 특이성과 억제제 특이성 실험을 통해서 정제된 효소가 곤충의 AChE의 특성을 가지고 있 음을 확인했다. 집파리의 경우에는 특이적인 기질이 ATC로, 특이적인 억제제는 BW284C51로 측정되었다. 꿀벌의 경우에는 특이적인 기질이 ATC로, 특이적인 억제제는 eserine과 BW284C51로 측정되었다. 집파리 의 AChE는 초원심분리를 통해서 막단백질 형태와 수용성 단백질 형태로 분리 추출되었다. 유기인계 살 충제에 대한 in vitro 억제반응 실험에서, 살충제의 종류와 곤충의 종류에 따라서 살충제의 억제도와 효소의 민감도는 차이가 나타날 수 있지만, 본 연구 결과로부터 나온 결론은 정제된 효소와 조추출된 효소 사이의 살충제에 대한 효소의 민감도 차이는 아주 극미했으며, 막단백질 형태의 효소와 수용성 형 태의 효소 사이의 효소 민감도 차이는 거의 없는 것으로 측정되었다.