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Study on the simplifying antibody cocktail technique for isolation of human mesenchymal stromal cells (hMSCs) : 사람 mesenchymal stromal cell(hMSC) 분리를 위한 간소화된 방법에 대한 연구
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- Authors
- Issue Date
- 2004
- Publisher
- 대한치주과학회
- Citation
- 대한치주과학회지 2004;34:93-100
- Keywords
- 인간 줄기세포 분리 ; 골모세포 ; 연골모세포 ; 지방세포 ; RosetteSep
- Abstract
- 많은 연구들에서 hMSC를 얻기 위해centrifugation, fluoroscence activated cell sorter(FACS), magnetic activated cell sorter(MACS)가 이용되어져 왔다. 그러나 certrifugation만을 이용한 경우 순도가 떨어지며 FACS나 MACS의 경우에는 비용, 시간이 많이 드는 단점이 있다. 따라서 이 연구에서는 antibody cocktail을 이용하여 hMSC를 좀 더 쉽게 얻어내는 방법에 대해 알아보았다.
사람의 골반에서 12G의 바늘을 이용하여 골수를 흡입한 후 heparin이 들어있는 시험관에 넣고 처리과정을 시행하기 전에 냉장고에 보관하며 가능한 한 빨리 처리과정을 실시한다.
얻은 골수에 적당량의 RosetteSep(Stemcell Technologies)을 첨가한 후 실온에서 20분간 반응시킨다. 그 후 적당량의 Ficoll-paque위에 골수와 RosetteSepd의 혼합물을 섞이지 않게 올리고 원심분리를 이용하여 원하는 세포층을 얻어낸다. 이 세포층을 따로 분리한 뒤 배양 시 세포가 80%이상 차기 전에 계속 passage를 시행하며 이는 세포가 밀도가 높아져 원치 않는 세포로 분화되는 것을 막기 위함이다.
배양된 세포가 다양한 분화능력을 가지고 있는지 알아보기 위해 세 7\74로 분화를 유도하였다. 적절한 배치와 적절한 환경에서 배양함으로써 얻어진 세포를 osteoblast, chondroblast, adipocyte로 분화를 유도하였다.
- ISSN
- 0250-3352
- Language
- English
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