혈관 평활근 세포 증식에 미치는 sEH 억제제들의 효능 평가

Abstract

soluble epoxide hydrolase (sEH)는 arachidonic acid의 대사체 중 하나인 epoxyeicosatrienoic acid (EET)를 dihydroxyeicosatrienoic acid (DHET)로 전환시키는 효소이다. EET는 항염증 작용 및 심혈관 보호 작용이 있는 것으로 알려져 있으며 sEH 억제제는 EET를 안정화시킴으로써 EET의 생성을 증가시키는 것과 동일한 효과를 보일 수 있다. 혈관 평활근 세포의 이상 증식 (neointimal hyperplasia)은 죽상경화증, 재협착 등의 혈관 질환을 악화시키는 원인이 된다. 본 논문에서 대표적인 sEH 억제제인 12-[[(tricyclo[3.3.1.13,7]dec-1-ylamino)carbonyl]amino]-dodecanoic acid (AUDA)의 혈관 평활근 세포 증식 억제 효능을 평가 시 농도 의존적인 혈관 평활근의 증식 억제를 관찰할 수 있었다. 기존 연구 결과에 의하면 Nrf2의 활성화에 따르는 heme oxygenase-1 (HO-1)의 유도가 neointima를 완화한다고 알려져 있으므로 AUDA의 Nrf2 경로에 대한 영향을 평가하였다. AUDA 처치는 혈관 평활근 세포에서 Nrf2의 활성을 억제하는 Keap1을 농도 의존적으로 감소시킬 뿐 아니라 Nrf2의 핵 내 이동을 시간 의존적으로 증가시켰으며, HO-1의 발현도 고농도 (10 μg/ml 이상)에서 증가시켰다. 본 연구실에서는 선행연구에서 세포 증식에 관여하는 peptidyl/prolyl isomerase, Pin1이 neointima 병변에서 증가되어있으며, 혈관 평활근 세포에서 Pin1의 과발현이 Nrf2/ARE 경로를 억제하여 HO-1의 발현 또한 억제함을 밝힌 적이 있으므로, AUDA의 Pin1 발현에 대한 영향을 평가하였다. 그 결과 PDGF로 유도된 Pin1의 발현도 AUDA에 의하여 농도 의존적으로 억제되었다. 이러한 AUDA의 혈관 평활근 세포 증식 억제 효과가 EET의 안정화와 관련이 있는 지를 규명하기 위하여 외인성 EET의 효과를 평가하였는데, EET 처치에 의하여 HO-1의 유도, Pin1 발현 억제 및 혈관 평활근 세포의 증식 억제가 나타나지 않았으므로 AUDA의 혈관 평활근 세포 증식 억제 효과는 생성된 EET의 안정화와는 무관하다고 할 수 있다. 한편 15 종의 신규 sEH 억제제의 혈관 평활근 세포 증식에 대한 효능을 평가 시 15종 화합물들의 sEH 활성 저해효과, Pin1 발현 억제 효과, 더 나아가 세포 증식 억제 효과 간에 부분적인 상관성이 있음을 밝혔다. 따라서 sEH 억제제의 혈관 평활근 증식 억제 효과는 EET 안정화와는 무관하고, Pin1 발현 억제와 관련이 있는 것으로 사료된다.