사람말초혈액단핵세포에서 Porphyromonas gingivalis의 분비물에 의한 사이토카인 발현 분석

Abstract

연구목적: 이 연구의 목적은 Porphyromonas gingivalis(P. gingivalis)가 분비하는 물질이 사람말초혈액단핵세포의 사이토카인 발현에 어떤 영향을 미치는가를 연구 분석하는 것이었다.

연구재료 및 방법: 실험군은 총 6 그룹으로 1) P. gingivalis 배양액 10 ㎕, 2) 배양액 100 ㎕, 3) 열처리 배양액 10 ㎕, 4) 열처리 배양액 100 ㎕, 5) BHI 배지 10 ㎕, 6) BHI 배지 100 ㎕ 이었다. 각 그룹에 대해 사람의 혈액에서 분리한 말초혈액단핵세포 (PBMC)에 각각 24시간과 48시간동안 처리한 후 mRNA를 분리하였다. 이 mRNA로부터 cDNA를 합성한 후 INF-γ, IL-4, IL-6, IL-1β, IL-17의 발현양을 Real time RT-PCR로 분석하였으며, 실험군의 발현양과 아무것도 처리하지 않은 대조군의 발현양을 paired t-test를 사용하여 유의수준 5%에서 비교하였다.

결과: P. gingivalis 분비물에 의해 IFN-γ, IL-1β의 발현양이 증가하였으며, IL-4의 발현양이 감소하였다. IL-6, IL-17의 발현양도 증가하였으나, 통계적 유의성은 없었다. 열처리 및 BHI 배지에 의한 발현양 변화 효과는 일관적이지 않았다.

Purpose: The purpose of this study was to investigate the effect of secreted molecules of Porphyromonas gingivalis (P. gingivalis) on cytokine expression in human PBMC.

Materials and Methods: The experimental groups were included as follows: Human PBMC were treated with culture supernatants of P. gingivalis (10 ㎕ and 100 ㎕), heat-treated culture supernatants of P. gingivalis (10 ㎕ and 100 ㎕), and BHI culture media (10 ㎕ and 100 ㎕) for 24 and 48 hours. The mRNA was extracted from each groups. cDNA was synthesized from the extracted mRNA and the mRNA expression level of INF-γ, IL-4, IL-6, IL-1β, IL-17 was analyzed by real time RT-PCR and compared with that of non-treated control group by paired t-test (p<0.05).

Results: Culture supernatants of P. gingivalis significantly increased the expression of IFN-γ and IL-1β mRNA, but decreased IL-4 mRNA expression. The expression level of IL-6 and IL-17 tended to be increased by P. gingivalis culture supernatants, although it was not significantly different from the control group. The effect of heat-treated culture supernatants or BHI medium on cytokine expression was inconsistent.