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Cell Viability Regulation by Targeting Cytochrome C using Magnetic Particle and Aptamer Complex : 박테리아 자성나노입자-압타머 복합체의 시토크롬 씨 표적화를 통한 세포 생존율 조절

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Authors

최정인

Advisor
이정훈
Major
협동과정 바이오엔지니어링전공
Issue Date
2012-02
Publisher
서울대학교 대학원
Description
학위논문 (석사)-- 서울대학교 대학원 : 협동과정 바이오엔지니어링전공, 2012. 2. 이정훈.
Abstract
Bacteria magnetic nanoparticle (BMP) has become one of important carrier molecule to deliver several molecules into the cell. Through using many advantages of BMP, for example, biocompatibility, ferromagnetic property, uniform particle size, BMPs have been used in various areas. In this research, cytochrome c specific DNA aptamers were attached to BMPs; they becomes to BMP-aptamer complexes, and then these complexes were introduced to human cervical cancer (HeLa) cell to control the viability. The specific responses of the transfected cell were observed by several methods. Through observation of cell viability, pictures of confocal and transmission electron microscope, DNA fragmentation, it is verified that the effect of BMP-aptamer complexes to the cell compare to that of only BMPs transfected cell in magnetic field. Furthermore, by using cytochrome c specific aptamer, direct physical stimulation to the cytochrome c that exists the inner membrane of mitochondria can be achieved; therefore, the function of cytochrome c can be also distinguished.
박테리아 자성 나노 입자는 최근 중요한 세포 내 전달 물질로 각광받고 있다. 생체적합성, 강자성, 균일한 크기 등 박테리아 자성 나노 입자가 갖는 중요한 성질을 통해 많은 분야에서 응용되고 있다. 이 연구에서는, 미토콘드리아 단백질인 시토크롬 씨에 특이적으로 반응하는 DNA 압타머를 자성 나노 입자에 접합하여 세포에 주입한 후, 세포의 생존율을 관찰하였다. 자성 나노입자와 자성 나노입자-압타머 복합체를 주입한 세포의 반응은 다양한 방식으로 관찰되었다. 세포 생존율, 형광·전자 현미경 사진, DNA 분열 여부의 관찰을 통해, 자기장 상에서의 자성 나노입자-압타머 복합체가 세포에 미치는 영향을 압타머가 부착되지 않은 자성 나노입자와 비교하여 확인할 수 있었다. 시토크롬 씨에 특이적인 압타머 사용으로 시토크롬 씨에 물리적인 자극을 줌으로 인하여, 미토콘드리아에서의 시토크롬 씨의 역할 또한 규명될 수 있다. 압타머를 이용하여 세포의 시토크롬 씨에 나노입자를 성공적으로 표적화하였으며, 여러 가지 방법으로 표적화를 확인하였다. 또한 표적화된 세포의 생존율이 기계적 자극을 통해 감소하였다. 세포 생존율이 줄어드는 원인은 세포 자살이 아닌 세포 괴사 때문이라 판단된다. 또한 나노입자-압타머 복합체가 결합된 시토크롬 씨의 영향을 파악하기 위하여 과산화수소수를 처리하여, 시토크롬 씨의 항산화 효능이 외부 과산화수소수 농도가 높은 상황에서 증가함을 규명하였다.
Language
eng
URI
https://hdl.handle.net/10371/155881

http://dcollection.snu.ac.kr/jsp/common/DcLoOrgPer.jsp?sItemId=000000000525
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